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多重标记免疫荧光实验服务来啦！
多重免疫荧光技术可解决组织原位细胞分型难点，该技术能够对组织样本中多达六个靶点甚至更多进行成像和分析（乳腺癌组织切片图）。它采用类流式的方法对细胞的表型和活性进行定量评估，同时还能提供组织微环境以及与细胞间的位置相关的信息，而目前其它技术无法实现这一点。
Opal™ 方法用于对福尔马林固定、石蜡包埋 (FFPE) 的组织进行多靶点荧光免疫组织化学标记。该方法的特点是可以使用同种属来源的多种一抗。其基本方法源于 Zsuzsanna Tóth 和 Éva Mezey 发表的技术1。使用 Opal 荧光标记时，荧光基团以共价键结合标记表位。标记完成之后，在不破坏Opal荧光信号的情况下去除非共价键结合的抗体。这样可以在下一个靶点标记时，无需担心抗体交叉反应。利用Opal可针对表达丰度不同的八点开发出具有平衡、定量信号功能的多靶点检测方法。
多光谱成像可消除荧光团交叉干扰和组织自发荧光干扰，有助于对组织样本内的每一个荧光信号进行精确测量。多靶点组织成像系统适用于拆分光谱重叠的荧光团和组织自发荧光。在定量测量中，分离样本中的所有荧光信号是至关重要的一步。
图像分析软件可以确定每个细胞核，浆，膜的强度值。该软件可以确定每个细胞核、浆、膜的强度值。将该信息与用户可训练的学习功能结合使用，可以对细胞进行分型，识别组织的类型（如肿瘤、真皮、基质、炎症），并且可以提供每个组织类型的细胞计数和密度。
Opal 7 色 IHC 红色：CD20、黄色：CD8、绿色：CD4、品红色：PDL1、青色：细胞角蛋白、橙色：FoxP3、蓝色：DAPI（细胞核）
TSA技术是基于酪胺信号放大技术(TSA，TyramideSignal Amplification)的多标记免疫组化染色方案，而Opal染料就是基于这一技术的荧光染料。TSA信号不受微波法影响，并能在抗体去除后保留信号（荧光基团以共价键结合标记表位，标记完成后在不破坏Opal荧光信号的情况下去除非共价键结合的抗体）。这样在下一个靶点标记时，无需担心抗体的交叉反应。
1、多重检测----可在一个切片上同时探测多个标记物，节约珍稀样本。
2、抗体选择不受抑制----可利用多个鼠源或者兔源抗体。
3、TSA信号放大----TSA附带信号放大功能，提高检测灵敏度。
